一、服務簡介
凝膠遷移(EMSA)是一種檢測蛋白質和DNA序列相互結合的技術,最初用于研究DNA結合蛋白和其相關的DNA結合序列相互作用,可用于定性和定量分析。目前用于研究RNA結合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。
蛋白質可以與末端標記的核酸探針結合,在瓊脂糖膠或非變性膠中電泳時這種復合物比無蛋白結合的探針在凝膠中泳動的速度慢,即表現為相對滯后。該方法可用于檢測DNA結合蛋白、RNA結合蛋白,并可通過加入特異性的抗體(supershift)來檢測特定的蛋白質,進行未知蛋白的鑒定。
二、技術流程
1、 核蛋白樣本提取與蛋白定量。
2、 生物素標記DNA3’端并去除TdT。
3、 Super-Shift反應,配制6.5%聚丙烯酰胺凝膠,配制好各反應體系,EMSA室溫結合反應20min,電泳上樣。
4、 電轉膜,操作方法同常規Western blot轉膜操作。
5、 紫外交聯,將核酸交聯于PVDF膜上。
6、 化學發光法檢測生物素標記的探針
三、服務說明
1、細胞樣本:需提供至少1*10^7細胞量;
2、新鮮組織樣本:大于500mg/樣本,干冰運輸;
3、目的基因信息、蛋白信息及待測樣本物種信息;
4、提供轉錄因子特異性抗體
5、若客戶已制備好探針、蛋白樣品可以提供
四、成果展示
五、詢價及訂購
感謝您選擇我公司的EMSA檢測服務。如有相關問題請聯系我們的工作人員。