一、服務簡介
JC-1是一種碳氰化合物類陽離子熒光染料,可作為檢測線粒體跨膜電位指示劑。JC-1在細胞內以聚合體和單體兩種不同的物理形式存在,分別處于不同的熒光發射峰。當JC-1 濃度低或膜電位水平低時,主要以單體形式存在,激發波長為527nm,呈綠色熒光;當JC-1濃度升高或線粒體膜電位水平較高時,形成聚合物,發出紅色的熒光,激發波長為590nm。當細胞發生凋亡時,線粒體跨膜電位被去極化,JC-1從線粒體內釋放,紅光強度減弱,以單體的形式存在于胞質內發綠色熒光,根椐這一特征就可以檢測線粒體膜電位的變化。
線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)是一種以JC-1 為熒光探針,快速靈敏地檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位變化的試劑盒,可以用于早期的細胞凋亡檢測。
二、技術流程
1、細胞重懸于0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。;
2、用適當的方法誘導細胞凋亡,同時設立陰性依照組合陽性對照組,收集細
胞;
3、用PBS洗滌細胞三次,收集不多于1×106的細胞;
4、加入0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中37℃孵育20
分鐘。
5、在孵育期間,按照每1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入4mL 蒸餾水
的比例配制適量JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
6、37℃孵育結束后,600g 4℃離心3~4 min,沉淀細胞棄上清,注意盡量不
要吸除細胞。
7、用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌2 次:加入1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重
懸細胞,600g 4℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入1mL JC-1 染
色緩沖液(1×)重懸細胞,600g4℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
再用適量JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用流式細胞儀分析。
三、服務說明
1、檢測細胞株(若實驗室有,可共享)。
2、待測毒性藥物(根據實驗方案有無)。
3、實驗設計方案或參考文獻。
4、flowjo原文件
四、成果展示
五、詢價及訂購
感謝您選擇我公司的JC-1細胞線粒體膜電位檢測服務。如有相關問題請聯系我們的工作人員。