一、服務簡介
細胞在發生凋亡時,會激活一些DNA內切酶,這些內切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細胞凋亡時抽提DNA進行電泳檢測,可以發現180-200bp的DNA ladder。基因組DNA斷裂時,暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上熒光素 (FITC) 標記的dUTP (fluorescein-dUTP) ,從而可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀進行檢測,這就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法檢測細胞凋亡的原理。
二、技術流程
1、TUNEL-熒光顯色:
基因組DNA斷裂時,暴露的3’-OH在末端脫氧核苷酸轉移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)的催化下加上熒光素 (如FITC) 標記的dUTP(fluorescein-dUTP),從而通過熒光顯微鏡或流式細胞儀進行凋亡檢測。
2、 TUNEL-DAB顯色:
基因組DNA斷裂時,暴露的3'-OH在末端脫氧核苷酸轉移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)的催化下加上生物素(Biotin)標記的dUTP(Biotin-dUTP),隨后和辣根過氧化物酶(HRP)標記的Streptavidin (Streptavidin-HRP)結合,最后在HRP的催化下通過DAB顯色來顯示凋亡細胞,從而通過普通光學顯微鏡檢測到凋亡的細胞 。
三、服務說明 1、待測組織樣本石蠟切片,常溫運輸;冰凍切片,干冰運輸;如需我司切片,則石蠟切片及冰凍切片需分別提供多聚甲醛固定的樣本4℃冰袋運輸或新鮮樣本干冰運輸。
2、準備待測樣品制備組織切片或細胞爬片,并根據所選顯色檢測方法進行TUNEL檢測凋亡
3、顯色結果拍片,分析并整理結果報告。
4. 實驗周期:1-2周;
5. 若另有疑問歡迎向本公司咨詢,我們將竭誠為您服務。
四、成果展示
五、詢價及訂購
感謝您選擇我公司的Tunnel檢測細胞凋亡服務。如有相關問題請聯系我們的工作人員。