一、服務簡介
原代細胞(primary culture cell)是指從機體取出后立即培養的細胞。原代細胞不僅廣泛應用于分子、細胞生物學和生物醫學基礎研究,如蛋白質組學、基因組學、細胞株(系)研究、DNA,RNA和遺傳學研究等,還可應用于當今熱門的生物醫藥產業如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等。原代細胞在生物醫藥領域有不可替代性作用。
原代細胞是來源于不同組織器官,胚胎及血液的新鮮樣本經特殊實驗方法處理而制備的原初培養細胞,這一過程被稱為原代細胞分離。原代細胞具有保持原有細胞的基本性質,如果是正常細胞,仍然保留二倍體數。
細胞的分離純化和細胞培養技術是細胞生物學實驗的基礎。我們通常把第一代至第十代以內的培養細胞統稱為原代細胞。原代細胞培養是指將組織從動物體內取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA) 或機械方法剪碎處理,分散成單細胞,在合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖的過程。
二、技術流程
酶消化分離法(過夜冷消化法)
①細胞間質較少的軟組織,如肝、腎、甲狀腺、羊膜、胚胎組織、上皮組織等,用Hanks液清洗組織三次,剪成碎塊大小為4毫米左右。②再用Hanks液洗2-3次以除去血球和脂肪組織。③加入0.25%的胰蛋白酶,搖勻后放4℃過夜。④次日再用Hanks液洗滌,棄去上清,共洗2-3次。⑤加入少量含血清的培養基吹打分散,細胞計數,按適當的濃度分瓶培養
非酶消化法(EDTA消化法)①把組織塊剪碎,呈1mm3大小的組織塊。②將碎組織塊在平皿中用無鈣鎂PBS洗2-3次。③加入消化液(胰蛋白酶或膠原酶或EDTA)于37℃水浴中作用適當時間(中間可輕搖1~2次),若組織塊膨松呈絮狀可終止,若變化不大可更換一次消化液,繼續消化直至膨松絮狀為止。④棄去上清,加入含有鈣、鎂離子的培養基中止消化反應,并洗滌2-3次后,加入完全培養基。⑤用吸管吹打,使細胞充分散開后用紗網過濾后分瓶培養。
三、服務說明
1、明確告知所需種屬的某個部位細胞;
2、所需細胞量;
3、純度的要求;
4、若另有疑問歡迎向本公司咨詢,我們將竭誠為您服務。
四、成果展示
五、詢價及訂購
感謝您選擇我公司的原代細胞分離提取服務。如有相關問題請聯系我們的工作人員。