客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1、取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細胞培養箱中靜置2-3h,以穩定細胞狀態;
2、細胞拍照,留存照片;
3、待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養;
4、收集T-25培養瓶中的培養基,保留,用PBS清洗細胞一次;
5、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養瓶中,37℃溫浴,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養液終止消化;
6、用吸管輕輕吹打混勻,按1:2適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5ml,放入37℃,5%CO2細胞培養箱中培養;7、待細胞完全貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。
注意事項
1、培養基于4℃條件下可保存3-6個月;
2、在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作;
3、傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態;
4、懷信生物提供完全培養基,更有利于細胞生長;
5、該細胞只可用于科研。
備注:由于實驗所用試劑與操作環境的不同,以上方法供各實驗室參考。